第五人格作为一款非对称对抗竞技手游，提供了多种游戏模式以满足不同玩家的需求。匹配模式是最基础的玩法，由4名求生者和1名监管者组成，求生者需破译7台密码机中的5台并开启大门逃脱，监管者则需淘汰半数以上求生者获胜。该模式包含传统匹配与五人排位两种形式，后者需五人组队进行两场1v4对战，综合两场逃生人数判定胜负。排位模式在匹配规则基础上引入段位系统，分为八个主要阶段，赛季更替时段位会继承调整。自定义模式允许玩家自由选择地图与AI或好友对战，但无法完成角色演绎任务。
游戏内设有特色娱乐玩法，例如模仿者模式采用类似狼人杀的机制，10名玩家分为模仿者、神秘客和侦探团三个阵营，通过完成任务、投票淘汰等环节展开对抗。黑杰克模式则融入卡牌元素，监管者红蝶、杰克等角色因技能特性成为推荐选择，求生者阵营中空军、先知凭借道具刷新机制和辅助能力占据优势。这些特殊模式通过定期更新保持新鲜感，例如2025年4月推出的演绎之星活动结合了剧情演出与对战任务。
竞技性玩法方面，深渊的呼唤全球总决赛为代表的高阶赛事已进行至第八届，二十支战队通过小组赛展现不同赛区战术风格。普通玩家可通过排位系统提升实力，监管者与求生者分别有独立段位，高阶局对角色强度平衡更为敏感，如古董商、歌剧演员等角色常引发强度讨论。游戏通过共研服测试新监管者如杂货商瓦伦蒂娜，确保版本更新后的平衡性。
社交系统完善了模式体验，归宿系统允许60级玩家购买大厅并布置家具，协会系统提供交流平台，好友观战功能支持实时学习技巧。2025年七周年庆期间推出的非人哉联动活动，将角色皮肤与互动玩法结合。游戏持续优化违规行为监测，针对恶意放血等破坏体验的行为加强处罚，维护多模式环境公平性。
玩家可根据自身定位选择模式，新手建议从匹配模式熟悉基础机制，再尝试排位或娱乐玩法。所有模式均需注意团队协作，求生者需合理分配破译与救援，监管者要掌握角色特性与地图控制。游戏通过赛季精华、活动任务等奖励机制保持各模式活跃度，如第三十二赛季精华1推出的时空之影角色，为不同模式带来新的战术可能。
